溶瘤病毒（oncolytic virus，OV）是一類通過不同的調控機制在腫瘤細胞內復制進而裂解腫瘤細胞，但不影響正常細胞生長狀況的病毒，因其能特異性感染并殺傷腫瘤細胞已成為新近腫瘤治療研究的方向。隨著腫瘤免疫治療的發(fā)展，溶瘤病毒類藥物在惡性腫瘤等多種疾病中的治療潛力得到越來越多的關注，已成為生物制藥的研發(fā)熱點。為規(guī)范和指導溶瘤病毒產品的研究、開發(fā)和臨床評價，NMPA也相繼發(fā)布了《溶瘤病毒類藥物臨床試驗設計指導原則（試行）》和《溶瘤病毒產品藥學研究與評價技術指導原則（試行）》。

本文針對溶瘤病毒類藥物研發(fā)進展進行概述，下一期將圍繞其臨床生物分析注意事項進一步展開介紹。

溶瘤病毒作用機制

溶瘤病毒產品包括野生的、減毒的或經過基因修飾的具有復制能力的病毒產品，可選擇性地感染腫瘤細胞和/或選擇性地在腫瘤細胞中復制以裂解腫瘤細胞，也可同時表達外源基因以提高相應功能，還可通過刺激機體產生免疫反應達到治療目的。溶瘤病毒包括 RNA 和 DNA 病毒，可以針對多種類型的腫瘤，其治療腫瘤的機制在不斷研究中，目前比較公認的幾種主要機制為：

1)病毒在腫瘤細胞中通過自身增殖直接裂解細胞；

2)通過溶瘤病毒本身調控腫瘤細胞誘導腫瘤細胞凋亡及死亡；

3)通過溶瘤病毒攜帶的相應藥物或分子殺傷腫瘤細胞；

4)通過裂解的腫瘤細胞釋放的腫瘤特異性抗原，激活機體特異性免疫反應，增強全身抗腫瘤效應；

5)通過感染腫瘤細胞在腫瘤細胞內激發(fā)抗病毒免疫機制，釋放多種抗病毒因子和炎性因子，促進該腫瘤細胞或周邊腫瘤細胞死亡等。

圖1. 溶瘤病毒作用機制

1.溶瘤病毒分類

目前臨床研究較多的大部分是經過基因改造的溶瘤病毒，如腺病毒、單純皰疹病毒、痘病毒、柯薩奇病毒，也有少數天然未經改造的溶瘤病毒，如呼腸孤病毒。其中以基因改造后的腺病毒和單純皰疹病毒研究最廣。這些溶瘤病毒在病毒結構、大小、基因組、復制機制和宿主相互作用方面均存在差異和多樣性，而這些多樣性也更進一步為研究者們提供了對溶瘤病毒進行改造的機會。

圖2.溶瘤病毒分類

腺病毒

AdV 是一種無包膜的雙鏈DNA 病毒，進入細胞后在細胞核中表達病毒復制所必需的基因E1A 和E1B。E1A 和E1B 能調節(jié)視網膜母細胞瘤相關蛋白（retinoblastoma-associated protein，pRb） 和p53 信號轉導通路，促進宿主細胞的分裂和增殖，從而實現在細胞內大量復制。因此，缺失E1A 和E1B 基因可構建特異性感染pRb/p53 突變型腫瘤的OVs。

單純皰疹病毒

HSV是一種有包膜的嗜神經性雙鏈DNA病毒，具有HSV-1 和HSV-2 這2 種血清型，是研究最廣泛的DNA 病毒之一。HSV 有很大的基因組（約150kb），其中部分基因對病毒復制不是必需的，這為在不限制病毒的包裝效率的前提下插入外源功能性基因提供了足夠的空間，使其成為OVs 治療領域的一個極具吸引力的候選載體。

痘苗病毒

痘苗病毒(VV) 是一種雙鏈DNA病毒，基因組為180-200 kb，可在宿主細胞的細胞質中復制，具有感染細胞范圍廣、對腫瘤細胞的趨向性強、可攜帶大量外源DNA序列的能力等優(yōu)勢，可作為OV的研究候選。為了提高痘苗病毒的選擇性復制和裂解能力，已經進行了的外源修飾包括病毒胸苷激酶（TK）、痘苗Ⅰ型干擾素結合蛋白（B18R）或痘苗生長因子（VGF）的缺失。

呼腸孤病毒

RV 是一種無包膜的雙鏈RNA 病毒，天然存在于哺乳動物呼吸系統(tǒng)和腸道系統(tǒng)中，無明顯致病性，但對大鼠肉瘤病毒同源癌基因（rat sarcoma viral oncogene homologue，RAS）通路激活的細胞具有靶向裂解作用。由于80% 以上惡性膠質瘤RAS 信號通路異常，惡性膠質瘤常作為RV治療的理想適應證。

2.已上市溶瘤病毒藥物

圖3. 溶瘤病毒發(fā)展歷程

早在上世紀中期，溶瘤病毒開始被嘗試用于腫瘤治療，隨著腫瘤免疫治療的發(fā)展，溶瘤病毒類藥物在多種惡性腫瘤等中的治療潛力得到越來越多的關注。迄今為止已有多個溶瘤病毒藥物獲得不同國家的藥品監(jiān)管部門的上市批準，應用于腫瘤的臨床治療中，這也進一步推動了溶瘤病毒類藥物的研發(fā)。

2004 年，拉脫維亞批準一款非致病性的人腸道細胞病變孤兒病毒（enteric cytopathic human orphan virus）RIGVIR，用于黑色素瘤的臨床治療，成為第一款獲得監(jiān)管機構批準的用于腫瘤治療的溶瘤病毒。

2005 年， 經改造的腺病毒H101（Oncorine，重組人5 型腺病毒注射液，安柯瑞） 在中國獲批上市，用于治療原發(fā)灶、臨床晚期、復發(fā)的頭頸部腫瘤，對治療晚期鼻咽癌、膀胱癌等表現出非常好的療效。

2015 年10 月， FDA 批準T-VEC （Talimogene laherparepvec，Imlygic） 上市，T-VEC 是一種經過基因修飾的1 型單純皰疹病毒（HSV-1），用于治療晚期黑色素瘤，它可以在腫瘤細胞內復制并表達粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（GM-CSF），這是首個獲得FDA批準的溶瘤病毒類治療藥物。

2021 年11 月，日本第一三共宣布第三代HSV-1溶瘤病毒產品Delytact（Teserpaturev/G47Δ）被批準上市，這是首個獲批上市用于治療惡性膠質瘤的溶瘤病毒產品，也是目前全球獲批上市的第4 款溶瘤病毒產品。溶瘤病毒療法發(fā)展至今，已成為臨床上最有希望的癌癥免疫治療手段，受到國內外的廣泛關注。

圖4. 溶瘤病毒上市藥物

隨著系列溶瘤病毒藥物的上市以及在更多的臨床試驗中取得的積極結果，近年來，越來越多的研究者開始探索將一些新的病毒載體用于腫瘤治療，并不斷嘗試新的基因修飾以平衡抗腫瘤免疫應答和免疫原性，以及探索不同的給藥途徑、新的病毒遞送方式、與化療藥或免疫檢查點抑制劑的聯(lián)合用藥等。相信隨著溶瘤病毒研究的不斷深入，以及溶瘤病毒臨床生物分析領域研究經驗的不斷積累，溶瘤病毒療法在治療人類疾病中將會發(fā)揮更廣泛、更深入的作用。

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