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HER2系列推文的前兩篇詳細(xì)介紹了HER2基因突變、擴(kuò)增和蛋白過表達(dá)的檢測（熙寧小課-第127期 | 精準(zhǔn)治療的鑰匙（一） ：HER2變異檢測在藥物研發(fā)中的應(yīng)用、熙寧小課-第133期 | 精準(zhǔn)治療的鑰匙（二）：揭秘HER2基因擴(kuò)增/蛋白過表達(dá)），HER2基因擴(kuò)增和蛋白過表達(dá)的檢測結(jié)果判讀相對復(fù)雜，不同癌種也存在一定差異。本文將詳細(xì)介紹幾類常見癌種的HER2基因擴(kuò)增和蛋白過表達(dá)檢測結(jié)果的判讀方法。
PART 01
乳腺癌HER2判讀
所有乳腺原發(fā)性浸潤性癌都應(yīng)進(jìn)行HER2檢測。只要能獲取腫瘤組織，也應(yīng)該對復(fù)發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶進(jìn)行HER2檢測。采用免疫組織化學(xué)法檢測HER2蛋白的表達(dá)水平，采用原位雜交法檢測HER2 基因擴(kuò)增水平。
檢測流程：乳腺癌標(biāo)本一般可先做IHC檢測，IHC 3+判斷為HER2陽性，IHC 0和1+則判斷為HER2陰性，IHC 2+則需進(jìn)一步應(yīng)用原位雜交的方法進(jìn)行HER2基因擴(kuò)增狀態(tài)檢測，也可以選取不同的組織塊重新檢測或送其他實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測。
圖1 HER2免疫組織化學(xué)檢測判斷標(biāo)準(zhǔn)[3]
圖2 HER2雙探針原位雜交檢測判斷標(biāo)準(zhǔn)[3]
HER2/CEP17比值<2.0，平均HER2 拷貝數(shù)/細(xì)胞≥4.0且<6.0時(shí)，建議重新計(jì)數(shù)至少20個(gè)細(xì)胞核中的信號，如果結(jié)果改變，則對兩次結(jié)果進(jìn)行綜合判斷分析。如仍為上述情況，需要在FISH報(bào)告中備注：此類患者HER2狀態(tài)的判斷需結(jié)合IHC結(jié)果，若IHC結(jié)果為3+，HER2狀態(tài)判為陽性。若IHC結(jié)果為0、1+或2+，HER2狀態(tài)應(yīng)判為陰性。
注意事項(xiàng)
· 僅判讀浸潤性癌的膜染色，原位癌和細(xì)胞質(zhì)著色不納入評估。
· 正常上皮陰性。
· 乳腺癌骨轉(zhuǎn)移標(biāo)本，脫鈣會影響IHC評估，脫鈣標(biāo)本應(yīng)使用ISH檢測。
· 遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的乳腺癌，原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶都需要進(jìn)行HER2評估。
· 當(dāng)<10%的腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)強(qiáng)而完整的陽性或中等-強(qiáng)陽性但膜染色不完整應(yīng)該計(jì)2+，可以選用其他組織重做IHC或進(jìn)行ISH檢測。
· 在乳腺浸潤性微乳頭狀癌和部分有分泌現(xiàn)象的乳腺癌中，呈現(xiàn)特殊的基底及側(cè)膜U型染色模型時(shí)：如果膜表達(dá)為很深的棕褐色U型，可等同完整的細(xì)胞膜染色；若呈現(xiàn)弱?中等強(qiáng)度的細(xì)胞膜染色，應(yīng)判為HER2+，并需要行原位雜交檢測進(jìn)一步明確HER2狀態(tài)。
HER2低表達(dá)乳腺癌
約45%～55%乳腺癌呈現(xiàn)HER2低表達(dá)狀態(tài)，IHC1+，或IHC 2+且原位雜交HER2基因無擴(kuò)增。HER2低表達(dá)乳腺癌的治療成為乳腺癌診療的熱點(diǎn)問題。隨著抗體偶聯(lián)藥物在HER2低表達(dá)乳腺癌患者療效的確立，HER2低表達(dá)已成為乳腺癌新的靶向治療亞型[4]。
圖3 乳腺癌HER2低表達(dá)判讀流程[4]
PART 02
胃癌HER2判讀
所有經(jīng)病理診斷證實(shí)為胃癌的病例均有必要進(jìn)行HER2檢測；胃癌活檢標(biāo)本和手術(shù)標(biāo)本均適用于HER2檢測，對于新輔助治療后的病灶以及復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移病灶，如能獲得足夠標(biāo)本，建議重新進(jìn)行HER2檢測。
檢測流程：HER2狀態(tài)檢測首先選用IHC法；IHC 3+的病例判斷為HER2陽性，無需進(jìn)一步做原位雜交檢測；IHC 1+和IHC 0的病例，判斷為HER2陰性，無需進(jìn)一步做原位雜交檢測；IHC 2+的病例為不確定病例，需進(jìn)一步行原位雜交檢測，如原位雜交陽性，判斷為HER2陽性；如原位雜交陰性，判斷為HER2陰性[5,6]。
表1 胃癌HER2免疫組織化學(xué)染色判讀和評分標(biāo)準(zhǔn)[5]
表2 胃癌HER2雙探針原位雜交檢測判讀標(biāo)準(zhǔn)[5]
注意事項(xiàng)
· 手術(shù)樣本：胃癌中HER2的高表達(dá)與組織學(xué)類型和分化程度相關(guān)（腸型表達(dá)高于彌漫型，低級別與HER2高表達(dá)的相關(guān)性更高），因此選擇低級別和腸型腺癌的組織做IHC更合適；
· 活檢樣本： 1. 由于腫瘤的異質(zhì)性，應(yīng)盡量對所有活檢腫瘤組織進(jìn)行IHC；2. 活檢標(biāo)本的結(jié)果是基于表達(dá)最強(qiáng)陽性組織，而不是對多個(gè)活檢組織的結(jié)果進(jìn)行平均。
· 手術(shù)標(biāo)本和活檢標(biāo)本主要區(qū)別在于活檢僅需要5個(gè)腫瘤細(xì)胞簇。
· 與胃癌相比，胃食管交界腺癌HER2過表達(dá)率略高。
· 應(yīng)針對IHC表達(dá)最強(qiáng)的區(qū)域進(jìn)行ISH檢測。
· 組織固定不佳、非特異性染色（腫瘤細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核染色）、正常粘膜染色（腸化）的樣本應(yīng)該不做判讀或用ISH重新檢測。
· 完整基底膜或側(cè)向膜染色代表陽性，這與乳腺癌不同，乳腺癌強(qiáng)調(diào)完整細(xì)胞膜。
· HER2擴(kuò)增的腫瘤細(xì)胞腔緣通常不著色，因此沒有側(cè)向和基底膜著色，只有管腔表面著色的腫瘤細(xì)胞判讀為陰性 。
· 如果手術(shù)標(biāo)本IHC<10%強(qiáng)陽性，應(yīng)進(jìn)行ISH檢測，以排除假陰性。
· 對于著色強(qiáng)度相當(dāng)于IHC 3+水平、但陽性細(xì)胞比例不足10％的手術(shù)標(biāo)本，建議更換一個(gè)腸型成分較多的蠟塊再次進(jìn)行檢測。
· 如果再次檢測后仍達(dá)不到IHC 3+評分標(biāo)準(zhǔn)，則仍按指南推薦的評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行相應(yīng)評分，但需在報(bào)告中備注說明該病例的特殊性（如：不足10％的腫瘤細(xì)胞呈HER2陽性且強(qiáng)度相當(dāng)于IHC 3+），并建議在胃癌多學(xué)科診療小組進(jìn)行討論，必要時(shí)進(jìn)行FISH檢測 。
PART 03
尿路上皮癌HER2判讀
所有局部晚期或轉(zhuǎn)移性尿路上皮癌患者都應(yīng)進(jìn)行HER2蛋白表達(dá)檢測，同時(shí)推薦所有術(shù)后經(jīng)病理學(xué)診斷為肌層浸潤性尿路上皮癌(≥pT2期)的患者常規(guī)行HER2蛋白表達(dá)檢測[7]。
表3 尿路上皮癌HER2免疫組織化學(xué)染色判讀和評分標(biāo)準(zhǔn)[7]
表4 尿路上皮癌HER2基因擴(kuò)增檢測判讀標(biāo)準(zhǔn)[7]
注意事項(xiàng)
· 由于HER2在尿路上皮癌中腫瘤異質(zhì)性高，在判讀和評分時(shí)需先在低倍鏡下觀察整張切片，綜合判斷。
· 尿路上皮癌HER2 IHC著色部位為胞膜，可以存在胞漿胞膜均染色的情況，胞漿著色不應(yīng)掩蓋胞膜著色。
PART 04
結(jié)直腸癌HER2判讀
所有轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌應(yīng)進(jìn)行HER2免疫組織化學(xué)檢測，HER2過表達(dá)在所有結(jié)直腸癌中占2%~3%，常見于左半結(jié)腸癌、RAS野生型患者。目前，HER2過表達(dá)狀態(tài)被認(rèn)為可能是抗EGFR單抗療效的負(fù)性預(yù)測因子[8]。如果已知 RAS/RAF基因突變，則無需進(jìn)行HER2檢測[9,10]。
圖5 結(jié)腸癌NCCN指南HER2檢測[9]
圖6 直腸癌NCCN指南HER2檢測[10]
判讀標(biāo)準(zhǔn)：免疫組織化學(xué)檢測HER2陽性定義為：＞ 50%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)3+陽性（即細(xì)胞膜的基底、側(cè)邊或整個(gè)胞膜呈強(qiáng)陽性著色）。HER2評分為2+的患者應(yīng)通過 FISH檢測進(jìn)一步明確 HER2 狀態(tài)，HER2基因擴(kuò)增陽性定義為：＞50%的腫瘤細(xì)胞 HER2/CEP17比值≥ 2.0[9-11]。
PART 05
結(jié)語
熙寧生物|精翰生物的IHC和FISH平臺已經(jīng)成功完成了HER2蛋白過表達(dá)及基因擴(kuò)增的檢測方法開發(fā)，并順利在多個(gè)癌種中完成了驗(yàn)證。這些檢測方法還多次獲得了多家權(quán)威室間質(zhì)評機(jī)構(gòu)的高度認(rèn)可，便捷、可靠，可供申辦方直接使用。
此外，熙寧生物|精翰生物的病理平臺匯聚了一支技術(shù)精湛的病理醫(yī)生團(tuán)隊(duì)。這個(gè)團(tuán)隊(duì)在多個(gè)癌種HER2檢測結(jié)果判讀方面擁有豐富的經(jīng)驗(yàn)，能夠有效地支持申辦方在HER2檢測及結(jié)果判讀方面的需求。熙寧生物|精翰生物的病理醫(yī)生團(tuán)隊(duì)還可提供包括藥物臨床試驗(yàn)中的病理閱片、pCR病理學(xué)評估、數(shù)字化玻片掃描以及數(shù)字化病理分析等多項(xiàng)服務(wù)，全面滿足臨床試驗(yàn)中各種病理閱片的需求。
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熙寧|精翰 HER2 檢測室間質(zhì)評證書展示
參考文獻(xiàn)
[1] Nat Rev Cancer. 2021 Mar;21(3):181-197.
[2] Nature Reviews Clinical Oncology 17, 33–48 (2020).
[3] 乳腺癌HER2檢測指南（2019版），中華病理學(xué)雜志2019 年3月第48 卷第3期Chin J Pathol，March 2019, Vol. 48, No. 3.
[4] 人表皮生長因子受體2低表達(dá)乳腺癌臨床診療共識(2022版)，中華腫瘤雜志, 2022, 44(12) : 1288-1295.
[5] 胃癌HER2檢測指南 (2011版) ，中華病理學(xué)雜志2011年8月第40卷第8期Chin J Pathol, August 2011, Vol. 40, No.8.
[6] 胃癌Her2檢測指南(2016版) ，中華病理學(xué)雜志2016年8月第45卷第8期Chin J Pathol, March 2016, Vol. 45, No.8.
[7] 中國尿路上皮癌人表皮生長因子受體2檢測臨床病理專家共識，中華腫瘤雜志, 2021,43(10) : 1001-1006.
[8] 結(jié)直腸癌靶向治療中國專家共識，中華結(jié)直腸疾病電子雜志, 2022年10月 第11卷 第5期 Chin J Colorec Dis (Electronic Edition), October 2022, Vol, 11, No.5.
[9] NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology Colon Cancer Version 4.2023 — November 16, 2023.
[10] NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology Rectal Cancer Version 6.2023 — November 16, 2023.
[11] Lancet Oncol. 2016 Jun;17(6):738-746.
